作用不同：自动变速箱油是专用的，它有两方面的作用：对行星齿轮组起到润滑、散热、清洁的作用，另一方面是作为液压传动的媒介——这一点是手动变速箱油所不具有的。

性质差别：由于作用不同，手动变速箱油和自动变速箱油黏度有明显差异，手动变速箱油较为黏稠，自动变速箱油的主要作用是起到液压传动，因此流动性非常好，抗泡性能和空气释放性能也比手动变速箱油的要求更严。

颜色差别：手动变速箱油大部分是浅黄色（新油），使用之后颜色逐渐变深变黑。自动变速箱油大部分是鲜红色（也有少数是浅黄色），使用后颜色逐渐变深，变成暗红色、红褐色。